عملية قياس الطيف الطيفي لإنزيم الجيلاتين العملية الأساسية للتنميط الأنزيمي هي أولا فصل العينة عن طريق الرحلان الكهربائي SDS-polyacrylamide (SDS-PAGE ، الذي يحتوي على 0.1٪ من الجيلاتين) ، ثم استعادة نشاط MMP-2 و MMP-9 في العينة في نظام عازل مع أيونات معدنية ثنائية التكافؤ ، وتحلل الجل في الجل في مواقع الهجرة الخاصة بكل منهما ، وأخيرا تلطيخ الجل باللون الأزرق الفاتح Coomassie ، ثم إزالة اللون ، ويمكن أن تظهر الأشرطة البيضاء على الخلفية الزرقاء ، وتتناسب قوة النطاقات بشكل مباشر مع نشاط MMP-2 و MMP-9. مبدأ إعادة التوافق: أثناء الرحلان الكهربائي ، يرتبط SDS ب MMPs في العينة (بالطبع ، الربط القابل للعكس) ، ويدمر روابطه الهيدروجينية ، والروابط الكارهة للماء ويجعل MMPs غير قادر على لعب دورها في تحلل الجيلاتين ، وفقط عندما يتم وضع الغراء في Trition to elute (من الأفضل وضعه على شاكر ، 30 دقيقة / مرة ، تفعل 2 مرات أو 15 دقيقة / مرة ، 4 مرات. ليس من المناسب الجلوس ساكنا في تريتيون. ) ، حيث تتم إزالة SDS عن طريق ربط Trition ، يتم تجديد MMPs.
版权申明 | 隐私权政策 | حق النشر @2018 العالم المعرفة الموسوعية
